探討原子力顯微鏡與細胞固定技術(shù)
點擊次數(shù)：1064 更新時間：2023-01-12
原子力顯微鏡是一種以檢測探針與樣品間相互作用為特征的掃描力顯微鏡，主要有附有針尖的微懸臂、壓電掃描器、激光與光電檢測器及反饋控制系統(tǒng)等構(gòu)成。力敏感彈性微懸臂一端固定，另一端附有一微小的針尖，當針尖對固定在壓電掃描器上的樣品進行掃描時，隨距離變化的針尖-樣品間相互作用力會引起微懸臂變形，由激光源發(fā)出的一束激光照射到微懸臂的背面，并被反射到光電檢測器上，通過反饋控制系統(tǒng)即可記錄樣品的表面形貌或樣品-針尖間作用力等方面的信息，隨著原子力顯微鏡技術(shù)的迅猛發(fā)展，它在細菌吸附研究中的應用日趨廣泛，主要包括測定細菌表面形貌以及細菌與固相表面間的作用力。
原子力顯微鏡在研究細菌吸附時，使用了多種固定細菌細胞的方法。根據(jù)細菌固定的位置，可將固定方法分為兩類：一是細胞固定在支持物上，探針可以是氮化硅或硅探針，抑或是膠結(jié)有微米尺寸珠子的微懸臂，由于制作均質(zhì)性探針受到材料的限制，因此研究細菌與不同固相界面間的相互作用也將受到制約；二是細胞固定在探針上，即細胞探針，此種固定方法彌補了前面一種方法的不足，可用于探究細胞探針與任何感興趣的固相表面間的相互作用，但該技術(shù)的缺陷是細胞探針表面較大，成像的分辨率低，力測定值是探針與研究表面間微米水平接觸區(qū)域的力效應的平均值，且很難獲得準確的探針半徑及細胞或胞外大分子的取向。另外，兩類細胞固定技術(shù)都需要保持細胞的自然狀態(tài)，且細胞固定力大于細胞與界面間作用力。
