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電泳儀關(guān)于核酸電泳技術(shù)的一些種類區(qū)分
點(diǎn)擊次數(shù):1264 更新時(shí)間:2022-06-26
電泳是電解質(zhì)中帶電粒子在電場(chǎng)作用下,以不同的速度向電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。利用這種現(xiàn)象對(duì)化學(xué)和生物化學(xué)樣品進(jìn)行分離的儀器稱為電泳儀。20世紀(jì)30-40年代起,相繼發(fā)展了多種基于抗對(duì)流載體的電泳儀。傳統(tǒng)電泳儀由于受到焦耳熱的限制,只能在低電場(chǎng)強(qiáng)度下進(jìn)行電泳操作,分離時(shí)間長(zhǎng),分離效率低。20世紀(jì)80年代初,小內(nèi)徑毛細(xì)管用于電泳儀,由此產(chǎn)生了一種新型的毛細(xì)管電泳儀。
針對(duì)核酸電泳技術(shù)我們來(lái)做個(gè)介紹吧:
1.凝膠電泳
凝膠電泳是常用的一種蛋白表達(dá)分析技術(shù)。原理是根據(jù)檢體中蛋白質(zhì)分子量大小的不同,使其在電泳膠中分離。在大腸桿菌表達(dá)純化外源蛋白的實(shí)驗(yàn)中,SDS-PAGE更是不可少的操作。該技術(shù)能檢測(cè)蛋白的表達(dá)情況,以及分析目的蛋白的純度等。聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)用于分離蛋白質(zhì)較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
2.醋酸纖維素薄膜電泳
醋酸纖維薄膜電泳操作簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)。以醋酸纖維薄膜為支持物,由纖維素的羥基經(jīng)乙酰化而制成。這種薄膜對(duì)蛋白質(zhì)吸附小,能消除電泳中出現(xiàn)的“托尾”現(xiàn)象,具有分離速度快、樣品用量小的特點(diǎn),適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測(cè)。應(yīng)用于血清蛋白、血紅蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、類固醇激素及同工酶等的分離分析中,盡管它的分辨力比聚丙酰胺凝膠電泳低,但它具有簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)。
3.等電聚焦電泳
等電聚焦電泳是在電場(chǎng)中分離蛋白質(zhì)技術(shù)的一個(gè)重要發(fā)展。原理是在穩(wěn)定的pH梯度中按等電點(diǎn)的不同來(lái)分離兩性大分子。應(yīng)用于分離分子量相近而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)組分,在區(qū)帶電泳中分辨率好。常用的pH梯度支持介質(zhì)有聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠等。
4.毛細(xì)管電泳
又稱高效毛細(xì)管電泳。技術(shù)原理是以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的將液相分離,是一種利用電泳和電滲流的電動(dòng)力學(xué)原理,在一種空芯的微小內(nèi)徑的毛細(xì)管中進(jìn)行混合物的高效分離技術(shù)。毛細(xì)管電泳分類為毛細(xì)管自由溶液區(qū)帶電泳、毛細(xì)管凝膠電泳、毛細(xì)管等電聚焦電泳及膠束毛細(xì)管電動(dòng)力學(xué)色譜。